Терапия стволовыми клетками при азооспермии

Если биопсия пациента показывает наличие сперматид поздней стадии (удлиненные сперматиды), даже если естественное зачатие не сработает, сперматиды поздней стадии часто успешно используются в цикле ЭКО с применением ИКСИ. Однако любая стадия созревания сперматозоидов до удлиненных сперматид не приведет к успешному результату ЭКО.

На этом этапе, если половые клетки отсутствуют и поставлен диагноз синдрома только клеток Сертоли, то единственным вариантом отцовства ребенка будет использование донорской спермы или усыновление. Половые клетки — это незрелые сперматозоиды, которые имеют потенциал для роста и дифференциации в зрелые сперматозоиды. Их можно считать незрелыми и недифференцированными сперматозоидами. К ним относятся:

– Сперматогонии
– Первичные сперматоциты
– Вторичные сперматоциты
– Сперматиды ранней стадии
– Сперматиды поздней стадии

Наличие зародышевых клеток в ткани яичек является предпосылкой для терапии стволовыми клетками. Причина проста. Мы используем мезенхимальные стволовые клетки из собственной жировой ткани пациента для лечения стволовыми клетками. Мезенхимальные стволовые клетки имеют ограниченный потенциал дифференциации. Однако при правильных условиях они могут дифференцироваться во многие типы клеток. Мезенхимальные стволовые клетки в основном имеют тенденцию дифференцироваться в окружающие типы клеток, если только они специально не запрограммированы на дифференциацию в определенный тип клеток. В наших методах лечения не задействовано клеточное программирование. Собственные стволовые клетки, полученные из жировой ткани пациента, изолируются и вводятся в ткань яичек, где присутствуют зародышевые клетки. Имея зародышевые клетки в окружающей среде, стволовые клетки следуют за ними в качестве шаблона и также дифференцируются в зародышевые клетки. Однако это только одна часть процесса. Учитывая, что существующие зародышевые клетки в яичках пациента не способны завершить сперматогенез и стать полностью зрелыми сперматозоидами, необходимы дополнительные шаги для содействия такой дифференциации.

Когда мы вводим стволовые клетки в семенные канальцы, мы также вводим собственную плазму пациента, богатую тромбоцитами, которая получена из образца его периферической крови. Плазма, богатая тромбоцитами, богата факторами роста, которые обеспечивают клеточный рост и развитие, а также улучшают кровоснабжение тканей. Таким образом, стволовые клетки получают богатое вливание факторов роста в близлежащие области, чтобы способствовать их развитию. Кроме того, мы используем экзосомы, полученные из плаценты, для улучшения клеточной коммуникации в яичках.

Терапия стволовыми клетками в целом направлена на:

1- Увеличить популяцию половых клеток в ткани яичек путем введения стволовых клеток в ткань яичек.

2- Позвольте этим половым клеткам расти и развиваться с помощью факторов роста.

3- Улучшить клеточную коммуникацию и облегчить реакцию на гормональную стимуляцию с помощью экзосом.

Что такое плазма, обогащенная тромбоцитами (PRP)? PRP — это концентрация тромбоцитов, полученных из собственной крови человека, обогащенная факторами роста и биоактивными белками, которые способствуют заживлению и регенерации тканей. PRP обычно используется в медицинских и эстетических процедурах для ускорения восстановления поврежденных тканей, уменьшения воспаления и стимуляции пролиферации клеток.

Тромбоциты играют ключевую роль в заживлении ран и восстановлении тканей, высвобождая такие факторы роста, как:

⦁    Фактор роста тромбоцитов (PDGF): Стимулирует рост клеток и образование новых кровеносных сосудов.
⦁    Трансформирующий фактор роста-бета (TGF-β): Способствует восстановлению тканей и уменьшает воспаление.
⦁    Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF): Способствует образованию новых кровеносных сосудов.
⦁    Эпидермальный фактор роста (EGF): Способствует регенерации клеток и заживлению ран.

При введении PRP в целевую область эти факторы роста активируют и запускают естественные процессы заживления в организме, включая активацию стволовых клеток и синтез коллагена.

Что такое экзосомы?
Экзосомы представляют собой крошечные нановезикулы, обнаруженные в интерстициальном пространстве, а также в жидкостях организма. Из-за своих размеров экзосомы всегда считались артефактами или клеточным мусором, не имеющим физиологической функции. Однако, благодаря достижениям в исследованиях в области медицины, теперь известно, что они являются частью тщательно продуманной системы внутриклеточной коммуникации.

Экзосомы известны своим участием во всех типах клеточной коммуникации. Они обеспечивают локальные аутокринные сигналы между сходными типами клеток, локальные паракринные сигналы между разными типами клеток, а также отдаленные эндокринные сигналы. Участие в такой обширной клеточной передаче сигналов дало им название «сигналосомы». Когда экзосомы вводятся в организм, они улучшают связь по всем каналам, что способствует общему здоровью и функционированию клеток.

По сравнению со взрослыми стволовыми клетками экзосомы содержат на 300% больше факторов роста, которые необходимы для клеточного роста, развития и регенерации. Экзосомы можно вводить посредством внутривенной инфузии или можно направлять в определенное место путем прямой инъекции.

Как проводится терапия стволовыми клетками?
В North Cyprus IVF Center, терапия стволовыми клетками, которую мы проводим для лечения необструктивной азооспермии, использует коктейль из мезенхимальных стволовых клеток, богатой тромбоцитами плазмы и экзосом. Изоляция стволовых клеток требует хирургической процедуры, называемой липосакцией.

The процедура липосакции для получения мезенхимальные стволовые клетки (МСК) это минимально инвазивная хирургическая техника, используемая для сбора жировой ткани, которая является богатым источником МСК. Хирургическая процедура включает в себя ряд этапов:

1. Предоперационная подготовка:
Пациент проходит медицинское обследование, чтобы убедиться, что он подходит для процедуры. Оно включает в себя ряд гормональных тестов, потенциальное обследование мошонки и биопсию яичек для оценки клеточности семенных канальцев.

Пациенту также предлагается сдать ряд анализов крови для проверки функции печени и почек, а также некоторых маркеров опухолей, таких как альфа-фетопротеин (АФП) и бета-хорионический гонадотропин человека (b-ХГЧ).

2. Инъекция тумесцентного раствора:
Тумесцентный раствор, содержащий физиологический раствор, лидокаин (местный анестетик) и адреналин (для уменьшения кровотечения), вводится в целевую область. Этот раствор помогает разрыхлить жировые клетки, уменьшает боль и минимизирует кровотечение во время процедуры.

3. Извлечение жира (липосакция):
На коже делается небольшой надрез и канюля (тонкая полая трубка) вставляется. Канюля подсоединяется к вакуумному устройству, которое аккуратно отсасывает жировую ткань из таких областей, как живот, бедра или ягодицы.

4. Обработка жировой ткани:
Извлеченный жир собирается в стерильные контейнеры и обрабатывается для выделения МСК. Обработка включает:
Центрифугирование отделить жир от других компонентов, таких как кровь и жидкости,
Ферментативное пищеварение использование коллагеназы для разрушения внеклеточного матрикса и высвобождения МСК.
Фильтрация и промывка для очистки МСК и удаления мусора.

5. Реимплантация:
МСК готовятся в виде коктейля с PRP и экзосомами и вводятся непосредственно в целевые области яичек. Вся процедура выполняется в течение нескольких часов, когда пациент находится под седацией. Таким образом, процедуры липосакции и реимплантации проводятся за один раз, без необходимости в двух отдельных седациях.

Хотя процедура в целом безопасна, риски включают небольшие синяки, инфекцию или дискомфорт в месте липосакции или реимплантации. Этот метод широко используется в регенеративной медицине из-за высокой эффективности и универсальности МСК, полученных из жировой ткани.

Требуемая продолжительность пребывания на Кипре:
Большинство наших пациентов приезжают к нам из-за границы. Из-за обязательств на работе или дома время в пути может быть ограничено. Вот почему мы просим, чтобы предварительные анализы/биопсию проводились на месте до прибытия пациента, чтобы сократить продолжительность пребывания на Кипре. Ожидается, что вы останетесь на Кипре примерно на 3 дня для терапии стволовыми клетками. Это даст нам достаточно времени для проведения необходимых предоперационных анализов, получения образца крови и проведения процедуры. Ожидается, что вы останетесь на ночь в нашей больнице для наблюдения и сможете вернуться домой на следующий день.

Чего ожидать после процедуры? Показатели успешности:
После инъекции стволовых клеток необходимо ждать три месяца, чтобы увидеть эффект. Сперматогенез (производство и созревание сперматозоидов) занимает около 65–70 дней. Поэтому имплантированным стволовым клеткам потребуется именно этот период времени, прежде чем мы сможем увидеть какой-либо эффект.

Успех процедуры во многом зависит от исходной клеточности ткани яичек с самого начала. Пациенты, у которых уже есть сперматиды ранней или поздней стадии в ткани яичек (Jоценка по шкале Онсена 7 или 8) — это группа пациентов, у которых самые высокие шансы на успех при терапии стволовыми клетками. В большинстве случаев мы можем наблюдать зрелые сперматозоиды в эякуляте по истечении трехмесячного периода. Хотя количество зрелых сперматозоидов в эякуляте будет недостаточным для естественного зачатия, мы часто планируем и проводим успешный цикл ЭКО с этой группой пациентов. Вероятность успешного получения зрелых сперматозоидов в эякуляте у этой группы пациентов составляет около 75%.

Пациенты, у которых в семенных канальцах нет сперматид (возможно, их несколько), но есть вторичные сперматоциты (Оценка по шкале Джонсена от 5 до 6) также, как правило, наблюдают улучшение своей сперматогенной активности, что может привести к появлению зрелых сперматозоидов, которые могут попасть в эякулят. Однако в этой группе пациентов наблюдение зрелых сперматозоидов в эякуляте встречается реже. Мы ожидаем, что в этой группе пациентов мы сможем найти созревающие сперматиды в биопсии яичек для использования во время цикла ЭКО. Если анализ спермы, проведенный через три месяца после терапии стволовыми клетками, не покажет наличие сперматозоидов в эякуляте, то следующим шагом будет организация процедуры извлечения сперматозоидов из яичек с целью получения жизнеспособных сперматозоидов, которые можно будет использовать во время ИКСИ. Вероятность успешного получения зрелых сперматозоидов в эякуляте в этой группе пациентов составляет около 25%. Вероятность обнаружения жизнеспособных сперматозоидов либо в эякуляте, либо с помощью TESE составляет около 40%.

Пациенты, у которых в семенных канальцах имеются только первичные сперматоциты (Оценка Джонсена 4) вряд ли будут наблюдать зрелые сперматозоиды в эякуляте после процедуры стволовых клеток. В большинстве случаев мы видим улучшение сперматогенной активности в том смысле, что ткань становится более заселенной половыми клетками. Однако у большинства пациентов мы не находим достаточно зрелых сперматозоидов для использования во время ИКСИ. Успех у этой группы пациентов можно оценить в 15%, то есть у 15% пациентов будут достаточно зрелые сперматозоиды, которые можно будет использовать в цикле ЭКО.

На основании нашей статистики пациентов на сегодняшний день, пациенты, у которых в семенных канальцах присутствуют только сперматогонии (Оценка Джонсена 3) имеют вероятность 6% иметь достаточно зрелые сперматозоиды, которые можно будет использовать во время ИКСИ после процедуры пересадки стволовых клеток.

Мы не ожидаем успешного результата в группе пациентов с показателем по шкале Джонсена 2 или ниже (синдром только клеток Сертоли или отсутствие клеток).

Что такое индекс Джонсена?

The Система подсчета очков Джонсена — гистологический метод, используемый для оценки образцов биопсии яичек путем оценки сперматогенеза (производства спермы) в семенных канальцах. Разработанная SG Johnsen в 1970 году, система присваивает числовую оценку каждому семенному канальцу на основе наличия и зрелости половых клеток, а также общего состояния сперматогенеза. Она обычно используется при оценке мужского бесплодия.

Критерии оценки
Каждому семенному канальцу присваивается оценка в диапазоне от 1-10 на основе следующих критериев:
Оценка 10: Полный сперматогенез с множеством видимых сперматозоидов.
Оценка 9: Слегка сниженный сперматогенез, но присутствует много сперматид поздней стадии.
Оценка 8: Несколько поздних сперматид, что указывает на умеренное нарушение сперматогенеза.
Оценка 7: Наличие большого количества ранних сперматид, но отсутствие поздних сперматид или сперматозоидов.
Оценка 6: Наличие нескольких ранних сперматид, но отсутствие поздних сперматид или сперматозоидов.
Оценка 5: Присутствует много сперматоцитов, но нет сперматид или сперматозоидов.
Оценка 4: Присутствует небольшое количество сперматоцитов, но нет сперматид или сперматозоидов.
Оценка 3: Сперматогонии (предшественники половых клеток) присутствуют, но сперматоциты, сперматиды или сперматозоиды отсутствуют.
Оценка 2: Только клетки Сертоли, без зародышевых клеток.
Оценка 1: В биоптате семенные канальцы не обнаружены (сильное повреждение яичек).

Интерпретация результатов

А более высокий балл указывает на нормальный или почти нормальный сперматогенез.
А более низкая оценка отражает нарушенный или отсутствующий сперматогенез.
Рассчитав средний балл по шкале Джонсена Во всех исследованных канальцах мы можем количественно оценить степень нарушения сперматогенеза и принять обоснованное решение о вариантах лечения, например, перейти к вспомогательным репродуктивным технологиям, использовать лечение стволовыми клетками или рассмотреть варианты донорства.

Стоимость терапии стволовыми клетками при необструктивной азооспермии:
Стоимость терапии стволовыми клетками для лечения необструктивной азооспермии составляет 7000 евро, включая протокол PRP, липосакцию и очистку стволовых клеток, экзосомы и имплантацию в ткань яичек. Ночь пребывания в больнице также включена в эту смету.

Пожалуйста, не стесняйтесь связаться с нами Чтобы получить больше информации.